在生物医学研究的前沿,精准的免疫组库分析是解锁疾病机制和开发新疗法的关键。艾沐蒽凭借在免疫组全长测序领域的深厚积累,现重磅推出ImmuHub® 5’RACE Ultra全新建库技术,1个样本1次反应即可获得7条免疫受体链的测序结果,全面覆盖TCRα/β/γ/δ和IGH/K/L,为科研和临床提供高质量的免疫组测序服务。
ImmuHub® 5’RACE Ultra 建库技术原理
ImmuHub® 5’RACE Ultra建库技术,通过在RNA的5’端加一个我们自主专利技术的接头,利用接头和 不同链的 C 恒定区序列设计引物,一管法扩增7条链的 VDJ全长区域,匹配不同的测序读长模式得到不同的区域信息。同时每个RNA分子添加唯一的分子标识符(UMI),避免了PCR和测序错误,确保了测序结果的准确性和可靠性,真实反映样本中的免疫组库状态。
ImmuHub® 5’RACE Ultra 技术特点优势
ImmuHub® 5’RACE Ultra技术是基于经典的RNA+UMI+5’RACE建库方法,具有多种优势:
- 还原真实状态:采用UMI(唯一分子标识符)技术,有效避免PCR和测序过程中的错误,确保实验数据的真实性和可靠性。
- 高效灵敏:该方法不仅稳定性高,而且灵敏度强,即便是极少量的珍贵样本也能成功建库。
- 全面兼容:可扩增VDJ全长信息,匹配多种测序模式PE150/PE250/PE300,满足不同研究需求。
详见“一文讲清!免疫组测序技术研究:RNA VS DNA?多重PCR VS 5’RACE?”
同时ImmuHub® 5’RACE Ultra 技术还具有更多其它科研优势:
1.样本量要求更少,价格更低
无需加倍样本量,一次取样的样本量可覆盖多个免疫受体链的分析,减少重复取样的需求。对于临床样本量较少或难以获取的情况(如肿瘤活检、分选样本),这种方案尤其具有优势。
2.研究数据全面性与准确性提升
通过7条链同时检测,能够更加全面地了解免疫系统的多样性和复杂性,特别是在免疫监测和疾病状态评估中,可能捕捉到通过单链检测遗漏的关键信息。全面的免疫受体特征分析可以提供更精细的克隆扩展、免疫多样性及体细胞突变的信息。
如在肿瘤相关研究中,过往大多研究都集中在TCR测序,而近年来的很多研究发现,肿瘤的发生变化和BCR反应也有相关性。所以同时TCR/BCR测序研究很有必要。
例如:
- Aizik等人采用B细胞受体高通量测序(BCR-Seq)来分析肿瘤浸润淋巴细胞B细胞(TIL-Bs)的抗体库特征,以及其在不同组织中的分布情况。数据表明抗体库特征是识别肿瘤反应性B细胞的良好指标。
3.更加适配的一体化分析流程
特别开发的生信分析系统ImmuHub® [VisXCR] software,能直接对下机数据进行高质量的可视化免疫组分析,一键出报告。
4.研究效率提升
一次检测完成7条链的分析,相当于提高了数据生成和解读的效率,减少了多个样本批次之间的比较误差。检测结果和单独某一条链一致性高(图1),7条链扩增效率稳定,各链的多样性比例也符合生物学特征(图2)。这对科研项目、临床诊断及药物开发中时间敏感的工作尤为重要。
图1
图2
5.免疫重构监测更加精准
在进行疾病相关的免疫重建(如移植后或癌症治疗后的免疫恢复)监测时,7条链检测能更全面地捕捉到T细胞和B细胞重构的情况,提供更完整的免疫应答和恢复动态。
6.应用领域更广泛
多条链的联合检测不仅适用于癌症免疫监测,还能广泛应用于自身免疫疾病、传染病和过敏反应等免疫相关的疾病研究和诊断,更好地服务于科研和临床的不同需求。
过往主要研究集中在重链TCRβ/IGH的研究,而关于其它链的分析研究较少,而很多研究表明这些链在科研应用中也具有重要意义。
例如:
- 浙江大学药学院联合浙江寿仙谷植物药研究院研究了灵芝孢子(GLS)对雌二醇苯甲酸酯(EB)诱导的小鼠胸腺萎缩的影响及其机制,特别是GLS如何通过影响TCRα链的重排来调节胸腺细胞的发展。该研究强调了TCRα链在胸腺细胞发展过程中的重要作用。详见:艾沐蒽TCR测序助力探索灵芝改善免疫功能的作用机制
7.灵活性与定制化
可以根据客户的需求进行定制化分析方案。提供多条链检测后,用户可以选择只分析特定链,增加了实验的灵活性。
艾沐蒽科技始终致力于推动生命科学研究的进步,此次推出的ImmuHub®5’RACE Ultra建库方法,不仅在技术上实现了重大突破,更在实际应用中展现了显著的优势。通过一次反应即可完成7条免疫受体链的测序,这项服务显著提升了科研效率,同时提高了临床检测的精度和可靠性。