在癌症治疗的漫长征程中，免疫疗法的出现无疑为神经母细胞瘤患者带来了新的希望。而CAR-T细胞疗法作为免疫疗法中的明星技术，近年来更是取得了令人瞩目的进展。然而，关于其长期疗效和安全性的数据仍然有限。最近，一项发表于《Nature Medicine》的研究为我们揭示了GD2 CAR-T细胞疗法在神经母细胞瘤治疗中的长期效果，为这一领域的未来发展提供了重要参考。
研究团队在2004年至2009年期间，对19名神经母细胞瘤患者进行了表达靶向 GD2 的嵌合抗原受体 (CAR) 的 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 特异性 T 淋巴细胞和激活的 T 细胞的临床研究。为了追踪这些细胞在体内的持久性，研究人员在CAR构建中加入了独特的条形码序列。通过这些条形码，他们可以在患者体内检测到这些CAR-T细胞的存在，并评估其长期疗效。研究结果
生存数据分析
研究结果显示，GD2 CAR-T细胞疗法在神经母细胞瘤治疗中展现出显著的长期疗效和安全性。在接受治疗的19名患者中，有 12 名在输注后 2 个月至 7 年内死于复发性神经母细胞瘤。7名患者存活至今，其中5名患者的随访时间超过13-18年，一名患者甚至在治疗后18年仍保持完全缓解状态。
在治疗第一年后，研究人员通过检测外周血中的CAR-ATC和CAR-VST转基因评估了19名患者的CAR-T细胞持久性，发现8名患者（42.1%）在1年后仍可检测到转基因，其中5名患者的转基因存留超过5年，且长期生存者（LTS）的转基因存留时间显著长于非LTSs（P = 0.0002），这表明持续的CAR-T细胞可能有助于长期疾病控制。进一步研究中，从3名LTS冻存的PBMC样本中解冻并扩增CAR-T细胞后发现，尽管早期样本中仍可检测到CAR+ ATC和VST细胞，但后期样本中这些细胞数量显著减少甚至消失，这可能归因于第一代CAR结构的局限性和输注前未进行淋巴清除的影响。
ATC vs VST
为了进一步了解CAR-T细胞的功能特性，研究人员对部分患者的CAR-T细胞进行了单细胞RNA测序结合TCR克隆型分析。结果显示，ATC更倾向于形成中央记忆型T细胞，而VST则更倾向于形成效应型T细胞。此外，ATC的TCR多样性显著高于VST，这可能是其长期存留能力更强的原因之一。不同簇的CAR-T细胞表达不同的功能相关基因，包括效应基因（如GZMB、IFNG、PRF1）、记忆基因（如TCF7、SELL、CCR7）和耗竭基因（如TOX、HAVCR2、LAG3、PDCD1）。
小 结
这项研究首次证明了CAR-T细胞疗法在实体瘤治疗中的长期疗效，证明了GD 2 CAR-ATC/VST治疗可以安全地使难治性/复发性神经母细胞瘤儿童达到长达18年以上的完全缓解，且未观察到与CAR-T疗法相关的恶性病变或其他长期副作用。这一结果为CAR-T细胞在实体瘤治疗中的应用提供了重要证据，并展示了其在长期疾病控制方面的潜力。尽管第一代CAR-T细胞存在局限性，但其显著的临床效果仍为后续研究奠定了坚实基础。未来的研究可通过引入共刺激结构域、结合淋巴清除策略等方式进一步提升CAR-T细胞的疗效和持久性，推动其在更多癌症类型中的应用。
参考文献：Li, CH., Sharma, S., Heczey, A.A. et al. Long-term outcomes of GD2-directed CAR-T cell therapy in patients with neuroblastoma. Nat Med (2025). https://doi.org/10.1038/s41591-025-03513-0
CAR-T治疗伴随监控解决方案
一、CAR-T疗法
CAR-T细胞疗法是一种基于人工修饰的T细胞治疗，可以通过CAR（chimeric antigen receptor）分子靶向识别肿瘤细胞表面抗原，进而杀伤癌细胞。
艾沐蒽的CAR-T治疗解决方案可以用来评估CAR-T疗法的效果。它可以帮助研究人员评估CAR-T对免疫系统的影响，并且在治疗后的随访过程中评估免疫系统的重建情况，并评估CAR-T细胞的持久性。它可以帮助研究人员了解疗法的效果，更好地评估疗效，并有效地监控治疗后的情况。
Fig. CAR-T 细胞免疫疗法原理示意图
二、TCR测序助力CAR-T研发和伴随监控
T细胞免疫组库测序以T细胞为研究目标，艾沐蒽基于ImmuHub®技术平台，扩增TCR β链 VDJ重排基因全序列，再进行高通量测序，从而评估T细胞克隆构成和多样性。近年来，TCR测序被广泛应用在CAR-T细胞治疗领域。
具体详见:艾沐蒽解决方案|助力CAR-T研发和伴随监控
三、检测流程
对于CAR-T治疗后的CAR-T持久性评估，治疗后效果评估，免疫重建水平的监控非常重要。
艾沐蒽结合自身产品，包括Seq-MRD®，Immun-Traq®，和ImmuHub®的技术优势，整合了一套专为CAR-T的研发和监控的伴随解决方案。
CAR-T研发和伴随监控解决方案检测流程
在CAR-T研发中，本解决方案可以用来检测CAR-T细胞的克隆性和持久性，可以帮助优化CAR-T治疗的设计和优化CAR-T细胞的生产过程，以提高CAR-T治疗的疗效和安全性；同时通过Seq-MRD®检测评估CAR-T治疗后MRD水平，帮助研究人员评估CAR-T疗效，并且在治疗后的随访过程中评估免疫系统的重建情况；并可以动态追踪CAR-T持久性情况，可以帮助研究人员了解疗法的效果，更好地评估疗效，并有效地监控治疗后的情况。
四、送检要求
五、荣获浙江省科技进步一等奖
艾沐蒽联合浙大附一黄河教授完成的《新型CAR-T细胞研发及其治疗恶性血液病临床转化创新体系建立》获2023年度浙江省科学技术进步奖一等奖。
六、发表相关文献
1.Wang, X. et al. Quantitative characterization of T-cell repertoire alteration in Chinese patients with B-cell acute lymphocyte leukemia after CAR-T therapy. Bone Marrow Transplantation (2019).
2.Huang, Y. et al. Predictive value of next-generation sequencing-based minimal residual disease after CAR-T cell therapy. BMT (2022)
3.H.Chen. et al. Minimal residual disease detection by next-generation sequencing of different immunoglobulin gene rearrangements in pediatric B-ALL. Nature Communications (2023)
4.Min’er Gu, et al. The effectiveness of blinatumomab in clearing measurable residual disease in pediatric B-cell acute lymphoblastic leukemia patients detected by next-generation sequencing.
5.Yan N, Wang ZL, Wang XJ, et，al. Measurable residual disease testing by next generation sequencing is more accurate compared with multiparameter flow cytometry in adults with B-cell acute lymphoblastic leukemia
6.Yongxian Hu. et.al. Sequential CD7 CAR T-Cell Therapy and Allogeneic HSCT without GVHD Prophylaxis. The New England Journal of Medicine(2024).
杭州艾沐蒽生物科技有限公司成立于2016年，是国际前沿的专注于免疫驱动医学技术的国家高新技术企业。创始人团队来自美国芝加哥大学，在2010年开始使用免疫组基因高通量测序技术开展各种疾病相关研究，于2016年通过自主研发，全国首家推出NGS-MRD血液肿瘤微小残留病（MRD）检测Seq-MRD®，并授权泛生子使用。同时，公司拥有Immun-Traq®肿瘤治疗伴随诊断、Immun-Cheq® |免疫测评以及ImmuHub®免疫组测序科研服务产品，并布局有基于AI机器学习算法的T-classifier®肿瘤早筛、单细胞测序、TCR-T和抗体发现等平台管线。目前为止发表了数十篇论文，其中包括：The New England Journal of Medicine(IF:158.5), Nature(IF:65), Signal Transduction and Targeted Therapy(IF:40), Cellular and Molecular Immunology(IF:24), Nature Communications (IF:17)等多篇高分杂志。公司构建几十项发明专利和软件著作权为核心的自主知识产权体系，为医院临床、生命科学研究、新药开发等提供解决方案和产品。艾沐蒽专注于通过解码适应性免疫系统来改变疾病的诊断和治疗，并致力于推进免疫驱动医学领域发展。