成人急性淋巴细胞白血病（ALL）的预后存在高度异质性，受患者特征、疾病特征等各种因素的影响。可测量残留病（MRD）是ALL临床结果的有力预测指标，可以评估治疗反应，预测复发风险，逐渐成为ALL治疗决策中的核心工具。
MRD不同检测方法的敏感性、特异性和临床意义有所差别，何时以及如何评估MRD，如何合理地指导临床决策具有复杂性。近期《blood advances》杂志发表了一篇来自美国专家小组的关于成人ALL MRD检测的综述文章，总结了MRD检测应用中的常见临床问题，并给出合理化建议，对于我们的临床工作也具有借鉴和指导意义。另外这篇文章对于如何解读NGS MRD报告结果也给出了详细建议。
下面就让我们一起来详细了解下吧~
目前常见的几种MRD检测方法都各有其优缺点，总结如表1。
表1
对于B-ALL患者，基于NGS的白血病特异性IG/TR 克隆型 MRD 定量是临床决策的首选。因为该方法比其他检测具有更高的灵敏度和对复发的鉴别力。
在ph阳性ALL患者中，NGS的IG/TR检测和BCR::ABL1的RT-PCR是MRD评估的补充方法。NGS方法对白血病克隆的特异性高于BCR::ABL1的RT-PCR，因此可能更适合预测预后和大多数治疗决策。
对于T-ALL患者，IG/TR的NGS检测和其他MRD检测是MRD评估的补充方法。NGS方法比其他方法具有更高的灵敏度，但在T-ALL中还没有得到很好的验证。
当IG/TR的NGS检测因为某些原因不可用时（比如没有可追踪的克隆、经济成本考虑、需要紧急决策时），或需要评估抗原表达以选择抗原定向免疫治疗时，MFC检测可以提供帮助，和其他MRD检测相辅相成。
对于无法进行IG/TR的NGS MRD检测的ph阳性ALL患者，IG/TR的PCR检测优于BCR::ABL1的RT-PCR或MFC。在IG/TR的NGS或PCR都不可用的情况下，BCR::ABL1的RT-PCR优于MFC。
MRD的外周血（PB）监测具有避免侵入性骨髓（BM）采样的优点。有研究证明了基于PB和BM的NGS MRD检测结果具有很强的相关性。但是PB中的疾病负担可能比BM低1到2个对数倍，因此PB监测可能无法检测到非常低水平的MRD。
对于BM受累的患者，建议至少在记录到MRD阴性之前监测BM MRD。在使用高质量BM样本达到MRD阴性后，可以考虑进行PB MRD监测（单独或与定期 BM评估交替），最好使用高灵敏度的NGS MRD检测，以减少侵入性BM检查的频率。
对于单纯髓外疾病（如B细胞或T细胞淋巴母细胞淋巴瘤）患者，PB MRD监测可能在临床上有用，但很少有数据支持其在这种情况下的使用。
在接受一线ALL治疗的患者中，达到MRD阴性的时间在风险分层中起着重要作用。关于MRD评估的时机和频率，我们之前也总结过国内外指南和专家共识中的建议，详见“史上最全淋系血液肿瘤MRD检测最佳时机总结！”
接受一线ALL治疗的患者应在诱导后接受MRD评估，在最初的2至3年内至少每3至4个月进行一次。对于诱导后MRD仍阳性的患者以及具有不良风险疾病特征且复发风险相对较高的患者，应考虑更频繁的 MRD评估（例如每1-2个月一次，直到记录到MRD 阴性）。
对于接受同种异体HSCT或CAR-T细胞治疗的患者，应在HSCT或CAR-T细胞治疗前进行MRD评估（对于血液学缓解患者），并且在HSCT或CAR-T治疗后的至少第一年内每2至3个月进行一次。
在确定个体患者的MRD监测持续时间时，应考虑总体复发风险、用基于PB的高灵敏度MRD检测作为BM评估的潜在替代方案的可用性、以及MRD监测的成本。
一些具有高危细胞分子特征的患者或接受标准治疗复发风险非常高的患者可能从同种异体HSCT中获益。良好的MRD动力学（持续MRD阴性）是否能抵消与高危细胞分子特征相关的不良预后？MRD信息可能对HSCT的决策具有指导意义。
对于标危ALL患者（包括无IKZF1 plus基因型的Ph 阳性ALL患者）在一线治疗开始后∼3 个月内通过基于NGS的IG/TR检测和/或通过BCR：：ABL1的 PCR（对于Ph阳性ALL）检测达到MRD阴性，不推荐进行常规同种异体HSCT。
对于在1×10-6灵敏度下达到MRD阴性的高危ALL患者，没有足够的数据推荐支持或反对同种异体 HSCT，应根据患者意愿、替代疗法的可用性和移植相关死亡风险，做出个体化决定。对于未接受同种异体HSCT的高危患者，应进行MRD的连续监测。
在接受blinatumomab的一线治疗后仍保持MRD阳性的患者预后较差，并且可能在首次缓解时受益于 HSCT。应考虑在HSCT之前根除MRD的策略，因为MRD阳性ALL患者的HSCT后结局较差。
在复发/难治性情况下，MRD阴性的实现也是预后因素之一。过去所有通过挽救化疗达到缓解的复发/难治性ALL患者都被建议进行同种异体HSCT作为唯一的治愈机会，但随着免疫疗法的进展，这种认知在发生变化。
复发/难治性ALL患者应接受异基因HSCT或CAR-t细胞治疗（最好是在临床试验的背景下），无论MRD对挽救性治疗的反应如何。在这些巩固方法之前根除MRD与更好的预后相关，但不是对所有患者都可行。
如果符合条件，应将CAR-T治疗后检测到MRD阳性的患者转诊进行异基因HSCT或研究性MRD定向治疗。
目前有几种有效的非移植疗法可用于MRD阳性B-ALL患者的治疗，比如有研究数据表明Blinatumomab对持续性或复发性MRD阳性的B-ALL患者具有很好的疗效，inotuzumab ozogamicin和CD19 CAR-T治疗也可能有效。
进行适当治疗后仍能持续检测到MRD的患者或MRD 复发的患者应接受MRD定向治疗。如果有高可信度报告的结果反映真实MRD的存在，无论其水平如何，都建议进行干预。
对于大多数MRD持续存在或复发且既往未接受过 CD19靶向治疗的B-ALL患者，推荐使用 Blinatumomab。
对于合适的患者，也可以考虑使用inotuzumab ozogamicin、CD19 CAR-T细胞疗法或研究性MRD靶向疗法，最好是在临床试验的背景下。
正确理解IG/TR的NGS MRD检测结果有助于围绕治疗干预做出治疗决策。基于NGS MRD分析的常见问题和解答如表2所示。
表2
当采用IG/TR的NGS MRD检测时，在开始MRD定向治疗之前，必须区分临床相关的MRD与低水平、非恶性背景序列。重复测试以评估克隆型的动态变化可能有助于区分真正的MRD和临床上无意义的背景序列。
应谨慎解释T-ALL患者中被追踪的TR序列的低水平MRD，因为在T-ALL中区分具有临床意义的MRD与背景序列尤其具有挑战性。
在模棱两可的情况下，应在开始治疗前权衡MRD定向治疗的风险和益处。对于不确定检测到的低水平序列是否代表真实MRD而建议观察的病例，应进行非常密切的连续监测以观察序列的动态变化，并在 MRD水平明显上升趋势的情况下开始MRD定向治疗。
当根据MRD结果做出治疗决策时，需牢记MRD的预后影响取决于环境，受所用检测方法及其灵敏度/特异性、评估时机和疾病相关特征（如细胞分子风险）等变量的影响。基于NGS的MRD检测可以达到1 × 10-6的灵敏度，这有助于更准确地评估治疗反应、风险分层和预测复发风险。随着在临床环境中使用更新的、高灵敏度的MRD分析生成更多数据，MRD检测的作用可能会进一步扩大，有望提高 ALL 患者的治愈率。
参考文献
Short NJ, et al. Clinical use of measurable residual disease in adult ALL: recommendations from a panel of US experts. Blood Adv. 2025 Mar 25;9(6):1442-1451. doi: 10.1182/bloodadvances.2024015441.
艾沐蒽专注于免疫组二代测序领域多年，是全国首家推出血液肿瘤NGS MRD检测产品Seq-MRD®的公司。Seq-MRD®适用于B/T系白血病、B/T系淋巴瘤、多发性骨髓瘤，能够帮助临床医生预测长期疗效、评估治疗效果、监测缓解状态以及检测早期复发。经过多年的积累和发展，Seq-MRD®在临床检测和科学研究上均取得不少成果，并获得国际市场认可。
获得欧盟CE资质认证
Seq-MRD®获得欧盟CE资质（注册号：DE/CA20/01-IVD-Luxuslebenswelt-190/22），获批的是人淋巴B细胞微小残留病基因检测试剂盒（可逆末端终止测序法）。
获得三项发明专利
艾沐蒽推出的Seq-MRD®血液癌症MRD检测是最早批实现商业化的产品，自2016年研发专利技术至今，艾沐蒽Seq-MRD®已经获得3项国家发明专利：
[1]“一种应用于高通量测序检测T细胞白血病微小残留病的引物组合及试剂盒”（专 利 号: 2016 11204857.0，授权公告号:CN 106957906 B）
[2]“一种检测微小残留病MRD的试剂盒”（专 利 号: 2018 1 1550133.0，授权公告号: CN 109652518 B）
[3]“一种检测微小残留病MRD的方法”（专 利 号: 2018 1 1549203.0，授权公告号: CN 109680062 B）
获得相关软件著作
[1]“免疫组库MRD检测自动化报告系统[简称ImmuReport] V1.0”（登记号：2019SR0916207）
[2]“Seq-MRD检测自动化分析系统（DiscTermite）[简称：DiscTermite]0.4.6“（登记号：2019SR1131517）
[3]“基于免疫组库二代测序的微小残留病（MRD）检测数据处理系统”（登记号：2020SR0507594）
获得荣誉证书
1、艾沐蒽联合浙大附一黄河教授完成的《新型CAR-T细胞研发及其治疗恶性血液病临床转化创新体系建立》获2023年度浙江省科学技术进步奖一等奖。Seq-MRD®在该技术的创新与应用中起到了关键性作用。
2、艾沐蒽申报的“免疫组TCR/Ig高通量测序技术/血液肿瘤微小残留病（MRD）检测/Seq-MRD®”因其创新性、前沿性、市场实用性荣获“2022年度CCTB中国肿瘤标志物产业创新大会创新技术/产品评选”项目二等奖。
2023年获批了【全血/骨髓基因组DNA提取试剂盒】（离心吸附柱法）备案编号：浙杭械备20230798 ，试剂盒分别适用于人外周血、骨髓样本的核酸的提取。
发表相关文献
Seq-MRD®发表相关文献
1、Huang Y, Zhao H, Shao M, Zhou L, Li X, Wei G, Wu W, Cui J, Chang AH, Sun T, Hu Y, Huang H. Predictive value of next-generation sequencing-based minimal residual disease after CAR-T cell therapy. Bone Marrow Transplant. 2022 Jun 1. doi: 10.1038/s41409-022-01699-2. Epub ahead of print. PMID: 35650329.（点击链接可查看文章内容）
2、Chen H, Gu M, Liang J, Song H, Zhang J, Xu W, Zhao F, Shen D, Shen H, Liao C, Tang Y, Xu X. Minimal residual disease detection by next-generation sequencing of different immunoglobulin gene rearrangements in pediatric B-ALL. Nat Commun. 2023 Nov 17;14(1):7468. doi: 10.1038/s41467-023-43171-9. （点击链接可查看文章内容）
3、Min’er Gu,Yahong Xia, Jingying Zhang, Yongmin Tang, Weiqun Xu, Hua Song Xiaojun Xu. The effectiveness of blinatumomab in clearing measurable residual disease in pediatric B-cell acute lymphoblastic leukemia patients detected by next-generation sequencing. Cancer Med. 2023 Dec;12(24):21978-21984. doi:10.1002/cam4.6771. （点击链接可查看文章内容）
4、Yan N, Wang ZL, Wang XJ, et，al. Measurable residual disease testing by next generation sequencing is more accurate compared with multiparameter flow cytometry in adults with B-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Lett. 2024 Jul 4;598:217104. doi: 10.1016/j.canlet.2024.217104.
获得国际市场认可
2023年DelveInsight公司发布的MRD国际市场研究报告中，艾沐蒽/Seq-MRD®是中国唯一一家公司/产品进入国际调研市场报告。DelveInsight是一家领先的医疗保健市场研究和商业咨询公司，以其现成的联合市场研究报告以及为医疗保健行业的公司提供的定制解决方案而闻名。
杭州艾沐蒽生物科技有限公司成立于2016年，是国际前沿的专注于免疫驱动医学技术的国家高新技术企业。创始人团队来自美国芝加哥大学，在2010年开始使用免疫组基因高通量测序技术开展各种疾病相关研究，于2016年通过自主研发，全国首家推出NGS-MRD血液肿瘤微小残留病（MRD）检测Seq-MRD®，并授权泛生子使用。同时，公司拥有Immun-Traq®肿瘤治疗伴随诊断、Immun-Cheq® |免疫力测评以及ImmuHub®免疫组测序科研服务产品，并布局有基于AI机器学习算法的T-classifier®肿瘤早筛、单细胞测序、TCR-T和抗体发现等平台管线。目前为止发表了数十篇论文，其中包括：The New England Journal of Medicine(IF:158.5), Nature(IF:65), Signal Transduction and Targeted Therapy(IF:40), Cellular and Molecular Immunology(IF:24), Nature Communications (IF:17)等多篇高分杂志。公司构建几十项发明专利和软件著作权为核心的自主知识产权体系，为医院临床、生命科学研究、新药开发等提供解决方案和产品。艾沐蒽专注于通过解码适应性免疫系统来改变疾病的诊断和治疗，并致力于推进免疫驱动医学领域发展。
