摘要：
化疗联合免疫治疗可改善一线非小细胞肺癌(NSCLC)晚期的治疗效果。我们设置两个组来研究非鳞状和鳞状NSCLC(nsqNSCLC/sqNSCLC)患者对PD-1抑制剂sintilimab（信迪利单抗）的安全性和疗效，并确定治疗反应后的潜在生物标志物。在1b期临床研究中设置两个组，nsqNSCLCs初次治疗患者，给予PD-1抑制剂sintilimab和化疗（D组），和sqNSCLC初次治疗治疗，然后进行只进行化疗（E组）。进行随访后，分析结果显示，Sintilimab（信迪利单抗）联合化疗在nsqNSCLC和sqNSCLC患者中表现出可控的毒性和抗肿瘤活性，且PD-L1表达和肿瘤突变负荷值与治疗效果改善均无显著相关性。
背景：肺癌是全世界癌症相关死亡率的主要原因，非小细胞肺癌（NSCLC）占诊断肺癌病例的85％，并且约70％的NSCLC患者为非鳞癌。铂化疗是缺乏靶向突变的1L晚期NSCLC患者的标准治疗，然而，总的临床结果并不理想，这使得化疗与免疫治疗相结合的治疗方法成为可能。pembrolizumab（派姆单抗）结合基于铂的化疗表现了良好的抗肿瘤活性以及对1L晚期NSCLC患者有可控的毒性。PD-L1是一个潜在的生物标志物，可以预测PD-L1肿瘤比例评分的1L转移的NSCLC患者对pembrolizumab单药治疗的反应。然而，nivolumab（纳武利尤单抗）的结果并不一致，PD-1抑制剂(pembrolizumab或nivolumab)联合化疗治疗NSCLC患者1L组，治疗效果与PD-L1表达无明显相关性。肿瘤突变负荷(TMB)已成为一种新的生物标志物来识别患者进行免疫治疗，在pembrolizumab或nivolumab单药治疗环境下，TMB水平较高的NSCLC患者表现出更好的反应和生存获益，然而，这些PD-1抑制剂加化疗作为1L治疗的联合设置结果存在差异。T细胞受体(TCR)在抗原识别中起重要作用，其主要可变区为互补决定区3 (CDR3)，TCR多样性和克隆性可以用来提示免疫检查点抑制剂(ICPi)治疗患者的临床结果。Sintilimab是一种高度选择性的抗PD-1抗体，与pembrolizumab和nivolumab相比，其与人PD-1的结合亲和力更高。
结果：
设计D、E两个组来初步评估sintilimab单抗-化疗对nsq/sqNSCLC患者的有效性和安全性。D组患者每3周接受多达4个周期的信迪利单抗（sintilimab）联合培美曲塞和顺铂治疗，E组中，患者每3周接受多达6个周期的信迪利单抗（sintilimab）联合吉西他滨和顺铂，联合治疗后，患者每隔3周接受先前剂量的sintilimab维持治疗，并在D组中使用Sintilimab加培美曲塞，在E组中使用sintilimab单药。对患者会进行随访观察，并采样提取RNA使用艾沐蒽生物科技公司的ImmuHub高通量测序TCR分析系统做深度分析。
1.疗效在D组中，19位患者中，13位（68.4％）达到PR，3位（15.8％）达到SD，3位患者发展为PD（15.8％）。
在E组中，17位患者中，11位（64.7％）达到PR，6位（35.3％）达到SD，并且没有患者发展为PD。
PR为部分缓解，SD为病情稳定，PD为疾病进展
D组的中位PFS（无进展生存期）为12.6个月，而在6个月和12个月时的PFS率为75.0％和54.0％。E组的中位PFS为6.5个月，在6个月的PFS率是76.0％，在12个月的为24.0％。
2.PD-L1表达与反应之间的相关性
D组中，可评估PD-L1表达水平的5位患者中有3位患者高表达，2位患者低表达（图3），对比发现，肿瘤反应与PD-L1表达无显著相关性。在E组中，12位可评估的患者中，有6例肿瘤PD-L1高表达（TPS≥1％），6例低表达，同样，在肿瘤反应与PD-L1表达之间也未观察到显著相关性。
3.肿瘤突变负荷（TMB)与反应之间的相关性
D组的TMB-H组6位患者的 ORR（客观缓解率）为83.3%，TMB-L组（TMB <4.25）7例ORR为71.4％（图 3A），在这组中，TMB高的患者没有显示出比TMB低的患者显着更好的反应（P > 0.05）。在E组中，TMB-H（TMB≥4.25）组的患者12例，TMB-L（TMB <4.25）组的患者8例，ORR分别为54.5％和83.3％（图 3B），TMB高的患者也没有表现出比TMB低的患者更好的反应。
4.TCR测序分析
两组中的11例患者进行TCR相关性分析，已进展且退出研究的患者为PD组，其余患者分为疾病控制DC组。在DC组中，治疗前后TCR克隆性指标比率更高，与PD组相比，统计学上无显著差异。在多样性指标上（治疗前后比率），与PD组相比，DC组显著性更低。TCR克隆性在治疗后比治疗前有增加的趋势，而PD组中表现为大致稳定的变化趋势。
为了更好地反映治疗效果与TCR变化趋势之间的关系，我们使用TCRC克隆性或TCRC多样性为1作为截止值，发现高TCRC克隆性与总生存期OS改善显著相关（图 4E）; 另外，低的TCRC多样性与延长的PFS明显相关（图 4）。
讨论：研究中，Sintilimab-chemo比nivolumab-chemo的反应有所增强，D组ORR为68.4％，E组ORR为64.7％。研究表明nsqNSCLC和sqNSCLC的患者中PD-L1表达与对sintilimab-chemo的反应之间无显着相关性，这与一项3期研究中的结果表现一致[2]。免疫-化学疗法策略还显示出改善的长期生存获益，1L nivolumab-chemo（派姆单抗结合基于铂的化疗PT-DC）对晚期NSCLC患者表现出有望的生存获益，中位PFS为4.8-7.1个月，中位OS为11.6至19.2个月，这比之前的数据都更长[3]。对于以前未经治疗的，缺乏EGFR或ALK突变的nsqNSCLC转移患者，与单独化疗相比，Pembrolizumab-chemo（pemetrexed + cisplatin / carboplatin）显著延长了中位PFS （8.8 m vs. 4.9 m）[2]。我们的结果表明，sintilimab-chemo可以改善长期生存率，其中nsqNSCLC患者的中位PFS估计为12.6个月，sqNSCLC患者的中位PFS为6.5个月。对抗PD-1 / PD-L1方案的反应后，机体有望产生新抗原特异性T细胞的克隆扩增[4]。TCR库克隆性增加与高密度的三级淋巴结构B细胞相关，这是非小细胞肺癌OS升高的生物标志[ 5]。在治疗前，高TCR多样性表明更好的免疫状态，其机制是高多样性可以通过增加更多潜在的肿瘤特异性T细胞来阻止免疫逃逸的程度，从而可以控制肿瘤细胞的生长并识别相应的抗原[6]。在我们的研究中，更高的TCRC克隆性（治疗后TCR克隆性的提高）或较低的TCRC多样性（治疗前的TCR多样性较高）与信迪利单抗化疗OS或PFS延长获益显著相关。但是，还需要进一步的证据来支持将这些指标作为PD-1抑制剂和化疗联合策略的有效预测指标的潜在用途。缩略词参考：
部分缓解：Partial Response(PR)病情稳定：stable disease(SD)疾病进展：progressive disease(PD)客观缓解率：Objective Response Rate(ORR)肿瘤突变负荷：Tumor mutation burden(TMB)总生存期：Overall Survival(OS)无进展生存期：Progression-free survival(PFS）
参考文献
Jiang, H., Zheng, Y., Qian, J. et al. Efficacy and safety of sintilimab in combination with chemotherapy in previously untreated advanced or metastatic nonsquamous or squamous NSCLC: two cohorts of an open-label, phase 1b study. Cancer Immunol Immunother (2020).