淋巴瘤Seq-MRD®检测介绍| 基于ct-DNA Ig/TCR NGS技术检测MRD

一、淋巴瘤是什么？

淋巴瘤是一种恶性肿瘤，由淋巴细胞异常增殖引起。

图1：显微镜下的淋巴瘤

在中国，淋巴瘤发病率为4.75/10万。淋巴瘤根据淋巴细胞类型和病变的部位分为不同亚型。淋巴瘤有80种左右的分类，大体可分为霍奇金淋巴瘤（HL）（占10%）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）（占90%）两大类。非霍奇金淋巴瘤主要包括B细胞淋巴瘤（约占70%）和T/NK细胞淋巴瘤（约占20%） 。

B细胞淋巴瘤是指淋巴细胞中的B细胞发生恶性变异，形成肿瘤。B细胞淋巴瘤包括弥漫大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤等不同亚型，具体分布如下图所示。

图2：B细胞淋巴瘤病型分布图

T细胞淋巴瘤是指淋巴细胞中的T细胞发生恶性变异，从而形成肿瘤。

T细胞淋巴瘤可以根据发病部位分为：皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、成人T细胞白血病淋巴瘤等不同亚型，具体分布如下图所示。

图3：T细胞淋巴瘤病型分布图

二、关于ctDNA

ctDNA（循环肿瘤DNA）是指肿瘤细胞释放进入血液循环中的DNA分子。

图4：ctDNA图解

由于肿瘤细胞在不断分裂生长的过程中，会释放一部分DNA进入血液循环中，这些DNA分子携带了肿瘤细胞的遗传信息，可以被检测到。

因此，ctDNA可以作为肿瘤生物标志物进行监测，用于肿瘤的早期筛查、诊断、治疗效果评估和复发监测等方面。

相比于传统的肿瘤检测方法（如组织活检和影像学检查等），ctDNA具有较多创新性的优点，下已列出。

随着科技的发展，新型的ctDNA检测方法层出不穷，其中就包括有数字PCR、下一代测序NGS和血清甲基化等。

在众多方法中，NGS脱颖而出，进一步为检测多种基因的突变和Ig/TCR重排等生物标志物的过程提高了检测灵敏度和特异性。

临床上，检测ctDNA已然成为一种新兴的技术，目前已经被应用于多种癌症的筛查、诊断、疾病监测和治疗等方面。

三、介绍淋巴瘤中Ig/TCR重排MRD检测原理

淋巴瘤虽属于具有组织结构的实体肿瘤，但与其他实体肿瘤相比，具有更易浸润骨髓、肿瘤细胞更易进入外周血循环的特点。

淋巴细胞的基本特征之一，每种B或T 细胞淋巴瘤都有特征性的免疫球蛋白（IG）或T细胞受体（TCR）重排序列（下图）。正常淋巴细胞未受任何刺激情况下，其基因重排是随机的，故细胞表现为多家族和多克隆性，具有发挥各种细胞免疫作用的潜能。

图5：TCR基因重组

图6：BCR基因重组

而在淋巴细胞白血病或淋巴瘤发生过程中，淋巴细胞在某一个或几个特定的TCR或Ig基因性重排的细胞中发生转化，导致TCR或Ig基因单克隆性表达，使淋巴细胞呈现为克隆性增殖。

从而在淋巴结，外周血或者骨髓细胞中出现1个或2个主要淋巴细胞克隆，呈单克隆性，TCR和Ig基因家族的单克隆重排是淋巴瘤细胞群的重要特征。

基于此原理，IG/TCR的克隆性重排检测能够在一定程度上指导对B/T细胞克隆性的判断。早期已有研究发现在B细胞肿瘤的血浆或血清DNA 中能检测到IG克隆性重排。

四、临床检测淋巴瘤MRD方法

淋巴瘤MRD的常规检测方法主要包括影像学检查（如CT、PET-CT等）和组织活检。这些方法虽然在一定程度上可以检测肿瘤的存在和发展情况，但也存在一定局限，比如：

基于 ctDNA 的方法在淋巴瘤的诊断和治疗中具有很大的潜力，ctDNA 检测可以作为一种非侵入性的诊断方法，能够对患者是否患有淋巴瘤进行快速、准确的检测。

目前基于ctDNA的MRD检测方法主要有基因突变位点的检测和Ig/TCR的检测

基于ctDNA的突变检测，虽然临床可根据检测结果进行对应用药的指导，但在MRD检测上也存在一些劣势之处，比如：

相比之下，基于ctDNA的Seq-MRD^®方法具有以下优势和临床应用功能特点：

总的来说，基于ctDNA的Seq-MRD^®方法具有较高的检测灵敏度和特异性，非常适用于淋巴瘤的MRD检测。

五、基于ctDNA的Seq-MRD®方法流程

六、样本运输要求